病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 II
采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和du特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 II
病毒基因组DNA RNA快速提取试剂盒 II
病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 II
目录号:91212
v 试剂盒组成、储存、稳定性:
试剂盒组成 | 保存 | 50次(91212-50) |
裂解液VLB | 室温 | 20ml |
去蛋白液RE | 室温 | 25ml |
漂洗液RW | 室温 | 10ml |
第一次使用前按说明加指ding量乙醇 | ||
RNase-free H2O | 室温 | 10ml |
RNase-free 吸附柱RA和收集管 | 室温 | 50套 |
室温储存12个月不影响使用效果, 各溶液使用后应及时盖紧盖子。
v 产品介绍:
采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和du特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求, 如病毒RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人类嗜T淋巴细胞病毒); 病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR/RT-PCR分析。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
v 产品特点:
1. 不需要使用有毒的苯fen等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3. 多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA/RNA 纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种常规操作,包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。
v 操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:第一次使用前请先在10ml漂洗液RW中加入40ml无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200μl血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9% NaCl或者PBS补足)转入上述1.5ml离心管,加入400μl 裂解液VLB, 立刻涡旋振荡充分混匀。
2. 室温(15-25℃)放置10分钟,每隔5分钟,振荡混匀一次。
3. 加入450μl无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。
如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
4. 将上述混合物加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。
如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱RA中。
5. 加500μl去蛋白液RE,12,000rpm离心30秒,弃废液。
6. 加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃废液,加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
7. 将吸附柱RA放回空收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8. 取出吸附柱RA,放入一个RNase free的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free H20(事先在 65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置1分钟,12,000rpm 离心1分钟。如果想得到较多量的DNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,12,000rpm离心1分钟。
洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要DNA/RNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积不应少于20μl,体积过小降低洗脱效率,减少DNA/RNA产量。
9. DNA病毒可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。RNA病毒建议最好立刻使用,否则立刻短期放置在-70℃备用。
病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 II