通用型植物总RNA提取试剂盒 核酸提取
适用于提取绝大多数植物根、茎、叶、花的总RNA，配有DNase I，在RNA吸附膜上消化gDNA，得到的RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。通用型植物总RNA提取试剂盒 核酸提取
Universal Plant Total RNA Mini Kit
通用型植物总 RNA 提取试剂盒（含 DNase I）
通用型植物总RNA提取试剂盒 核酸提取
目录号：91512
产品内容
产品成份 | 保存 | 91512-50（50 次） |
裂解液 RLA | 室温 | 50 ml |
去蛋白液 RW1 | 室温 | 40 ml |
漂洗液 RW | 室温 | 10 ml（需加入指ding量无水乙醇） |
RNase-Free H2O | 室温 | 10 ml |
DNase I | -20℃ | 0.25 ml |
DNase Buffer | -20℃ | 1.25 ml x2 |
RNA 吸附柱和收集管 | 室温 | 50 套 |
RNase-Free 1.5 ml 离心管 | 室温 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 室温 | 50 支 |
自备试剂
无水乙醇
保存条件
室温（15 ~ 25℃）下，存放 12 个月，不影响使用效果。
产品简介
适用于提取绝大多数植物根、茎、叶、花的总RNA，配有DNase I，在RNA吸附膜上消化gDNA，得到的RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。
本试剂盒是同类产品中适应性zui广泛，不但可以提取小麦、玉米、水稻、大豆、番茄、烟草、拟南芥等简单植物，也可以提取茶树叶片、棉花叶片、葡萄叶片、杨树叶片、番薯叶片、花生叶片、香蕉叶片、荔枝叶片、白松叶片等多糖多酚含量一般的植物。
如果遇到果实、种子、中草药，例如多糖多酚巨高的作物种子（小麦/玉米/大豆/水稻）、葡萄果实、蓝莓果实、百合鳞茎、土豆块茎，或者次级代谢产物巨丰富的葛根、虎杖、雪莲等药用植物，请选择果实种子总RNA提取试剂盒(Cat#91512-50)。
产品特点
1. 无毒：免氯仿、免β-巯基乙醇！
2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
3. 高效：提取全过程仅需 30 min！
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤
第一次使用前请先在漂洗液 RW 中加入指ding量无水乙醇，详见瓶身的标签。
提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。
1. 材料处理：
a．在液氮中研磨适量植物组织成细粉，取≤50mg细粉加入550μl裂解液RLA，剧烈涡旋震荡30sec，充分混匀。
冬天气温低，37℃摇床放置3min，可增强裂解效果，提高产量
b．将裂解物13,000rpm离心5~10min，沉淀不能裂解的碎片。
注意：使用1ml裂解液RLA去裂解≤100 mg 样品，RNA 产量会翻倍。
2. 小心吸取上清（约480μl，注意不要吸到沉淀）转入一个新的离心管中，加入0.5倍体积（约 240 μl）的无水乙醇, 吹打混匀。
3. 将≤750μl上清混合液加入RNA吸附柱中，13,000rpm离心2 min，倒弃滤液。此时，RNA被吸附在膜上。重复此过程，直到溶液全部上柱。
4. 加入350μl去蛋白液RW1，室温放置1min，13,000rpm离心30sec，倒弃滤液。
5. DNase I工作液配制：取45μl DNase Buffer和5μl DNase I至新的RNase-Free 离心管中，轻轻吹打混匀。（处理多个样品，按照比例放大）
6. 向RNA吸附膜中央加入50μl的DNase I工作液，室温放置15min。
7. 加入350μl去蛋白液RW1，13,000rpm离心30sec，倒弃滤液。
8. 加入500μl漂洗液RW，13,000rpm离心30sec，倒弃滤液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 将RNA吸附柱放回空收集管中，13,000rpm离心2min，除去膜上残留的乙醇。
11. 取出RNA吸附柱，放入RNase-free1.5ml离心管中，向RNA吸附膜的中央部位悬空滴加30-50μl RNase-free H2O，室温放置1min，13,000rpm 离心1min。
12. 提取的总RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。
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附录：
一、液氮研磨（自动研磨仪）—— 适用于各种样本
a. 把研磨模块也丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。
b. 在2.0ml液氮研磨管中放入3mm钢珠3粒，放进≤50mg样本，投入液氮中预冷。
c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置55个频率， 震荡30~60sec。（以北京赫得京N9548为例）
d. 研磨完成后，马上加550μl裂解液RLA，剧烈涡旋30sec，混匀。
e. 将裂解物13,000rpm离心5~10min，沉淀不能裂解的碎片。
二、免液氮直接研磨（自动研磨仪）—— 适用于新鲜样本
a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中加入 5 mm 钢珠 1 粒，加 1 ml 裂解液 RLA，放进≤100 mg 样本，设置 60 个频率，震荡 2 min。
b. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5~10 min，沉淀不能裂解的碎片。
通用型植物总RNA提取试剂盒 核酸提取
