果实/种子总RNA快速提取试剂盒 核酸提取
适用于快速提取果实、种子、中草药的总 RNA，gDNA 过滤器能高效滤除 gDNA， RNA 可直接用于 RT、RT-PCR、RT-qPCR、普通转录组测序、RACE、芯片等。果实/种子总RNA快速提取试剂盒 核酸提取
果实/种子总 RNA 提取试剂盒
Fruit / Seed Total RNA Mini Kit
果实/种子总RNA快速提取试剂盒 核酸提取
目录号：91513
产品内容
产品成份 | 91513-50（50 次） |
裂解液 FSL | 50 ml |
裂解液 ARL | 25 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量无水乙醇） |
RNase-Free H2O | 5 ml |
gDNA 过滤器和收集管 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 离心管 | 50 支 |
保存条件
室温（15 ~ 25℃），有效期 12 个月。
自备试剂
无水乙醇，β-巯基乙醇
产品简介
适用于快速提取果实、种子、中草药的总 RNA，gDNA 过滤器能高效滤除 gDNA， RNA 可直接用于 RT、RT-PCR、RT-qPCR、普通转录组测序、RACE、芯片等。
成功案例：稻谷种子、玉米种子、小麦种子、葡萄果实、板栗、樱桃、草莓、芒果、百合鳞茎、唐菖蒲的球茎、中草药的块根...
如果遇到果实、种子、中草药，例如：多糖多酚巨高的作物种子（小麦/玉米/大豆/水稻）、葡萄果实、蓝莓果实、百合鳞茎、土豆块茎；或者次级代谢产物巨丰富的葛根、虎杖、雪莲等药用植物，请选择 91513-果实种子总RNA 提取试剂盒。
产品特点
1. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
2. 高效：提取全过程仅需 30min！
注意事项
1. 如果 FSL 有析出或者沉淀，请将其置于 65℃水浴中，重新溶解后使用。
2. 样品应避免反复冻融，否则会影响 RNA 的提取得率和质量。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤：
重要提示：
① 第一次使用前请先在漂洗液 RW 中加入无水乙醇，加入量详见瓶身标签。
② 操作前，取1ml裂解液 FSL至2.0ml离心管内，加入5%的β-巯基乙醇
（例如：1ml FSL加50μl β-巯基乙醇），颠倒混匀后，65℃水浴中预热。多个样本按比例放大准备。
③ β-巯基乙醇是裂解液FSL的关键成分，必要的时候可以提高终浓度到10～20%，来防止样品褐化。如果碰到特别复杂的植物，可以尝试在裂解液中再加入PVP40至终浓度2%。
④ 所有离心步骤均需要在室温（15℃～25℃）下进行。
1. 材料处理：
a．将植物样本在液氮中迅速研磨成细粉。
b．转移 30～200 mg 细粉至 65℃预热的裂解液 FSL（已加有 β-巯基乙醇）中，立即剧烈涡旋震荡 30 Sec，充分混匀。
注意：水分多的样品（如草莓、西瓜果肉）投入 150～200 mg； 水分含量少的样品（如成熟的小麦/玉米/大豆种子）投入 30～40 mg； 淀粉含量高的块茎投入 40～80mg；叶片投入 50～100 mg。
c．短暂回放至65℃水浴5min，中间偶尔颠倒1～2次，帮助裂解。
d．将裂解物13,000rpm 离心5 ~10min，沉淀不能裂解的碎片。
e．转移上清（约 800~900μl）至新的2.0ml离心管中，加入0.5倍体积的无水乙醇（约400~450μl），吹打混匀。
2. 每次转移≤750μl上清混合液至gDNA过滤器中（过滤器放入收集管），13,000rpm离心2min，倒弃滤液。重复此过程，直到混合液全部转入gDNA 过滤器。此时，绝大部分 gDNA 被滤除，RNA和少量gDNA残留被吸附在膜上。
3. 取出步骤2的gDNA过滤器，放入一个新的2.0ml离心管中，加入500μl 裂解液 ARL，13,000rpm 离心30sec，收集滤液（RNA在滤液中），向滤液中加入250μl无水乙醇，吹打混匀。
4. 将滤液混合物加入RNA吸附柱中，13,000 rpm 离心2 min，倒弃滤液。此时，RNA被吸附在膜上。
5. 加入700μl去蛋白液 RW1，室温放置1min，13,000 rpm 离心30sec，倒弃滤液。
6. 加入500μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。
7. 重复步骤6一次。
8. 将RNA吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 离心2 min，除去膜上残留的乙醇。
9. 取出RNA吸附柱，放入 RNase-free1.5 ml 离心管中，向 RNA 吸附膜的中央悬空滴加 30~50μl的RNase-free H2O，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心1min。
10. 提取的总RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。
相关产品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (适用于所有qPCR仪
果实/种子总RNA快速提取试剂盒 核酸提取
