动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒
适用于快速提取各种动物组织、细胞、昆虫的总RNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒
FlashPure Tissue/Cell/Insect Total RNA Mini Kit
动物组织/细胞/昆虫总 RNA 提取试剂盒
动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒
目录号：91017
产品内容
产品成份 | 91017-50（50 次） |
裂解液 ARL | 50 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量无水乙醇） |
70%乙醇 | 9 ml（需加入指ding量无水乙醇） |
RNase-Free H2O | 10 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5 ml 离心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自备试剂
无水乙醇
保存条件
室温（15 ~ 25℃）下，存放 12 个月，不影响使用效果。
产品简介
适用于快速提取各种动物组织、细胞、昆虫的总RNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE等。
产品特点
1. 无毒：免lv仿、免β-巯基乙醇！
2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
3. 高效：提取全过程仅需 20min！
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤
提示：
第一次使用前，请先在漂洗液 RW 和 70%乙醇中加入指ding量无水乙醇。
所有离心步骤均需要在室温（15 ~37℃）下进行。
1. 动物组织、昆虫
a. 电动匀浆：取新鲜组织 10~20 mg 加入 350 μl 的裂解液 ARL，电动匀浆，直到无明显组织块即可。
b. 液氮研磨：转移 350 μl 裂解液 ARL 至 1.5 ml 离心管中。液氮研磨组织成细粉，取 10~20 mg 组织细粉转入装有裂解液的 1.5ml 离心管中，剧烈涡旋振荡，充分裂解。
( 注意：裂解 20-30 mg 动物组织，需要加入 600μl 裂解液 ARL )
c. 将匀浆后裂解物 13,000 rpm 离心 3 min，转移上清至新的离心管中。
d. 下接步骤 3。
2. 细胞
a. 悬浮细胞：离心收集细胞，加350μl裂解液ARL（<5x106 细胞）或600μl裂解液ARL（5x106-1x107 细胞），吹打混匀，剧烈涡旋振荡，充分混匀，裂解细胞。
b. 贴壁细胞：不需要消化，彻di吸干培养液后，直接加裂解液 ARL，反复吹打细胞，帮助裂解；细胞培养瓶要先用胰蛋白mei消化后离心收集细胞，然后加入裂解液 ARL，吹打混匀，剧烈涡旋振荡 20 sec，充分裂解。
（< 5x106细胞加 350 μl裂解液 ARL ；5x106-1x107细胞加 600 μl 裂解液 ARL）
（一般情况下，24 孔板、6 孔板、直径 3.5cm 的培养皿，每孔加 350 μl
裂解液 ARL，直径 6cm 以上的培养容器加 600 μl 裂解液 ARL）
c. 下接步骤 3。
3. 向上清或者裂解物中加入等体积（通常为 350 μl / 600 μl）的 70%乙醇，
吹打混匀。
4. 每次转移≤700μl混合物至一个RNA吸附柱中（吸附柱放入收集管中），13,000rpm离心30sec，倒弃滤液，此时RNA被吸附在膜上。重复此过程，直到溶液全部上柱。
5. 加入700μl去蛋白液RW1，室温放置1min，13,000rpm离心30sec，
倒弃滤液。
6.加入500μl漂洗液 RW，13,000rpm 离心30sec，倒弃滤液。
7. 重复步骤 6。
8. 将RNA吸附柱放回收集管中，13,000rpm离心2min，除去膜上乙醇。
9. 取出RNA吸附柱，放入一个新的 1.5 ml RNase-free离心管中，向吸附膜的中央部位悬空滴加30~50 μl RNase free H2O（事先在70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置1min，13,000 rpm 离心1min。
10.提取的RNA可直接用于下游实验，或于-70℃保存，避免RNA降解。
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附录：
一、免液氮直接研磨（自动研磨仪）——适用于新鲜样本
a. 在2.0 ml液氮研磨管中加入4 mm两粒，加600μl裂解液ARL，放进20mg 左右的样本，设置65个频率，震荡2min。
b. 将裂解物 13,000 rpm 离心 3 min，沉淀不能裂解的碎片。
二、液氮研磨（自动研磨仪）:
a. 把研磨模块丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。
b. 在2.0ml液氮研磨管中放入3mm 钢珠3粒，放进 20-30mg 样本，投入液氮中预冷。
c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置55个频率，
震荡30~60sec。（以北京赫得研磨仪——京 N9548 为例）
d. 研磨完成后，马上加600μl裂解液ARL，剧烈涡旋振荡,充分混匀。
e. 将裂解物13,000rpm 离心3 min，沉淀不能裂解的碎片。
动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒
