琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 NobleRyder D0910
北京诺博莱德科技有限公司供应琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 NobleRyder D0910量大优惠,咨询 :
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 NobleRyder D0910
北京诺博莱德科技有限公司供应琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 NobleRyder D0910量大优惠,咨询 : 1215878164
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
试剂盒组成 | 100T | 400T | 保存温度 |
溶胶液 | 50ml | 100ml×2 | RT |
玻璃奶 | 2.5ml | 10ml | RT |
TE缓冲液 | 10ml | 30ml | RT |
原理简介
本试剂盒利用*的缓冲液,可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
对于切下后不超过150mg的凝胶块,本试剂盒(以100T为例)可用100T。对于更小的凝胶块,本试剂盒使用次数更多。
注意事项
1、电泳时使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4、回收<200bp DNA片段时,应加大溶胶液的体积(如5倍体积或者更高)。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(可以用同一包装中的离心管去皮称量,各离心管间的误差可忽略)。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µl,则加入300µl溶胶液,如为小片段,可加入5倍体积或者更高体积),50-55℃水浴放置5-10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
3.玻璃奶混匀。取25ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中。混匀。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。