DNA产物纯化试剂盒 NobleRyder D0911
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北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。
DNA产物纯化试剂盒 NobleRyder D0911
DNA纯化试剂盒
试剂盒组成 | 100T | 400T | 保存温度 |
结合液 | 25ml | 100ml | RT |
玻璃奶 | 5ml | 20ml | RT |
TE缓冲液 | 10ml | 30ml | RT |
原理简介
本试剂盒利用*的缓冲液,可从PCR产物,连接产物,酶切产物等溶液中回收较大DNA片段,同时除去其它蛋白、无机盐及寡核苷酸引物等杂质。
对于50ul的含DNA样品,本试剂盒(以100T为例)可用100次。对于更小体积的样品,本试剂盒使用次数更多。如果一次纯化1ml样品,本试剂盒(以100T为例)可用5次。
注意事项
1、回收<200bp DNA片段时,应加大结合液的体积(如8倍体积或者更高)。
2、玻璃奶的多少决定吸附能力的大小,对于核酸含量低的样品,可适当减少加入量,同时减少加入洗脱液的量(TE缓冲液)。
3、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将含有DAN的样品离心,取上清转移到一新的离心管中(如无沉淀,可省去此步)。
2.向溶液中加入5倍体积结合液(如为小片段,可加入8倍体积或者更高体积)混匀。正常情况应该为淡黄色,如溶液变红,请加入不超过1/10体积的3M 乙酸钠 PH5.2。
3.玻璃奶混匀。取50ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中,混匀(如DNA含量过低,可减少玻璃奶加入量,如只加入20ul)。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入50ul左右TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。