Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 NobleRyder P0040
北京诺博莱德科技有限公司供应1、Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 NobleRyder P0040量大优惠,咨询 :
北京诺博莱德科技有限公司供应Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 NobleRyder P0040量大优惠,咨询 :
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒
试剂盒组成 | 包装(1000微孔) | 保存 |
Folin酚甲试剂A | 100ml×2 | 2-8℃ |
Folin酚甲试剂B | 5ml | 2-8℃ |
Folin酚乙试剂(1N) | 20ml | 2-8℃ |
PBS稀释液 | 30ml | 2-8℃ |
BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做1000孔。当使用2ml比色皿时可做100孔,如果是1ml比色皿时可做200孔。
产品简介
Folin-酚试剂法包括两步反应:*步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
使用说明
一,酶标仪法
1. 根据需要量,将Folin酚甲试剂A和Folin酚甲试剂B按50:1混合,其有效期为24小时,过期失效。
2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(标准品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。
3. 将样品作适当稀释(多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 将配好的Folin酚甲试剂每孔加入200微升,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。
5. 各孔加入20微升Folin酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
6. 使用温箱孵育时,应注意防止因水粉蒸发影响检测结果。
二,分光光度计法
如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。步骤如下:
1. 根据需要量,将Folin酚甲试剂A和Folin酚甲试剂B按50:1混合,其有效期为24小时,过期失效。
2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(标准品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。
3. 取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。
离心管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7(样品管1) | 8(样品管2) | 9(样品管3) |
标准蛋白BSA | 0 | 40ul | 80ul | 120ul | 160ul | 200ul | 200ul适当稀释的样品1 | 200ul适当稀释的样品2 | …… |
PBS | 200ul | 160ul | 120ul | 80ul | 40ul | 0 | 0 | 0 | 0 |
Folin酚甲试剂 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml |
混匀,室温放置10分钟 | |||||||||
Folin酚乙试剂 | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul | 200ul |
4.混匀,37℃放置30分钟。用分光光度计测定A650
北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 NobleRyder P0040