DNA退火缓冲液
本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火,不可用于RNA oligo 的退火。退火后产物可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
DNA退火缓冲液
D0110 DNA退火缓冲液 NobleRyder 5ml 80.00
本公司供应化学试剂的DNA退火缓冲液,*,欢迎洽谈。
简介:本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火,不可用于RNA oligo 的退火。退火后产物可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
操作步骤
1. 把要退火的DNA oligo用经灭菌的三蒸水配制成50μM。解冻Annealing Buffer for DNA Oligos(5X),混匀备用。如经常使用,本Buffer可放置2-8℃一个月。
2. 如下设置退火反应体系:
Annealing Buffer for DNA Oligos(5X) | 20μl |
DNA oligo A(50μM) | 20μl |
DNA oligo B(50μM) | 20μl |
Nuclease-Free Water | 40μl |
总体积 | 100μl |
按照上述顺序依次加入各种试剂,混匀。放入PCR仪。
3. 如下设置PCR仪进行退火反应:
步骤 | 温度 | 时间 | 说明 |
1 | 95℃ | 2分钟 | 让oligo充分变性 |
2 | 每8秒下降0.1℃,降至25℃(注1) | 约90分钟 | 退火 |
3 | 4℃ | 长时间保持 | 暂时存放 |
注1:如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能,也可以设置为每90秒下降1℃。
4. 退火结束后可以直接用于连接反应,也可以在-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应,用纯化试剂盒进行纯化,或者确保退火产物在反应体系中体积不超过10%,以避免AnnealingBuffer对后续的酶反应体系的干扰。
货号 | 产品名称 | 品牌 | 规格 | 价格(元) |
D0963 | 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 160.00/1200.00 |
D0962 | 2×Pfu PCR MasterMix (含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 160.00/1200.00 |
D0961 | 2×Taq PCR MasterMix (不含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 80.00/580.00 |
D0960 | 2×Taq PCR MasterMix(含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 80.00/580.00 |
D0965 | 2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 120.00/1000.00 |
D0964 | 2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 120.00/1000.00 |
D0110 | DNA退火缓冲液 | NobleRyder | 5ml | 80.00 |
D0973 | dNTP(10mM) | NobleRyder | 1ml | 80.00 |
D0974 | dNTP(2.5mM) | NobleRyder | 1ml | 40.00 |
D0951 | Pfu DNA Polymerase | NobleRyder | 500U/2500U | 180.00/720.00 |
D0033 | SYBR Green I(20×)定量PCR用 | NobleRyder | 1ml | 120.00 |
R0928 | SYBR Green II(10000×) | NobleRyder | 100ul | 520.00 |
D0950 | Taq DNA Polymerase | NobleRyder | 1000U/5000U | 80.00/320.00 |
D0952 | Taq Plus DNA Polymerase | NobleRyder | 500U/2500U | 140.00/560.00 |