等电聚焦电泳方法
一.仪器设备：
电泳仪，电泳槽，注射器，烧杯，量筒，试管，漏斗，滤纸，刻刀，移液器。
二.试剂配制：
1.电极缓冲液：
正极缓冲液：1mol/LH3PO4,11.5ml85%磷酸加水至100ml。
负极缓冲液：1mol/LNaOH,4g氢氧化钠加水至100ml。
2.品提取液：
40%制糖：40g蔗糖加水至100ml。
3.顺丁烯二酸缓冲液：
3.08gNaOH+5.8g顺丁烯二酸加水至1000ml。
4.1%a-奈酯：
1g醋酸-a-奈酯+100ml正丁酯。
5.7%冰醋酸：
70ml冰醋酸加水至1000ml。
6.固蓝RR盐+顺丁烯二酸缓冲液
三.电泳操作技术
1.样品处理：
1）浸泡：先将所需种子浸泡一段时间，以备取胚使用。
2）取胚：用刻刀把种子的胚取出，放入1.5ml离心管管内。
3）研磨：在离心管内加入120ul提取液，将胚研成匀浆，放入冰箱保存。
2.凝胶制备：
1）配制凝胶前，应把玻璃板准备好，即将两块干净的玻璃板叠放在一起，之间夹上所需凝胶厚度的胶条进行四边密封，一端留有小口来灌胶，然后用文具夹将玻璃板四周固定好。注意夹子作用力点在胶条正中，以防漏胶。
2）配制凝胶时，先将所需储备液自冰箱中取出放置温室。
3）将各种储备液按一定比例混合（见表）然后加入1ml左右的7号试剂，搅拌均匀，zui后用注射器吸净混合液，排除气泡，缓缓注入玻璃板的夹隙内。
4）将注入混合液的玻璃板静置放好，隔夜使用。
载体两性电解质
别名：两性电解质载体：Ampholyte solution Ampholine
性状；近无色至浅黄色透明液体，有粘性，为一中相对分子质量 300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度：为40％的溶液
用途：用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存：充氮密封4度干燥保存，SCRC 680007-680021
| P0300 | 蛋白电泳 | 1.5M Tris-HCL（PH8.8） | 100/500ml | 46.00/160.00 |
| P0220 | 蛋白电泳 | 10%过硫酸氨 | 1ml | 15.00 |
| P0210 | 蛋白电泳 | 10×电泳转移缓冲液 | 500ml | 100.00 |
| P0270 | 蛋白电泳 | 10×丽春红染液 | 10ml | 90.00 |
| P0290 | 蛋白电泳 | 1M Tris-HCL （PH6.8） | 100/500ml | 40.00/160.00 |
| P0230 | 蛋白电泳 | 30%丙烯酰胺/甲叉溶液（29:1） | 100ml/500ml | 60.00/180.00 |
| P0250 | 蛋白电泳 | 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液 | 100ml/500ml | 60.00/180.00 |
| P0260 | 蛋白电泳 | 4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液 | 100/500ml | 60.00/180.00 |
| P0235 | 蛋白电泳 | 40%丙烯酰胺/甲叉溶液（37.5:1） | 100/500ml | 80.00/280.00 |
| P0180 | 蛋白电泳 | 5×蛋白上样缓冲液（含DTT） | 1ml/10ml | 40.00/160.00 |
| P0170 | 蛋白电泳 | 5×蛋白上样缓冲液（配有β-巯基乙醇） | 10ml | 120 |
| P0190 | 蛋白电泳 | 5×非变性蛋白上样缓冲液 | 10ml | 100.00 |
| P0171 | 蛋白电泳 | 4×蛋白上样缓冲液（配有β-巯基乙醇） | 10ml | 100 |
| P0200 | 蛋白电泳 | Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液（干粉） | 10L | 180 |
| P0280 | 蛋白电泳 | 考马斯亮蓝快速染色液 | 500ml | 100.00 |
| P1006 | 蛋白电泳 | 载体两性电解质PH3.5-10 | 12ml | 580.00 |
