产品简介:
Schiff试剂又称雪夫试剂、希夫试剂等,是Schiff于1866年发现的一种有效的醛试剂,用于检测醛基(-CHO)。Schiff试剂主要成分是副品红碱,为三氨基三苯甲烷的氯化物,其中的醌基是品红显色原因。在酸化的品红液中加入亚硫酸或者亚硫酸盐,品红被还原为品红-亚硫酸(或称白亚磺酸),即Schiff试剂。
NobleRyder Schiff试剂主要用于糖原、黏液物质等染色,常与过碘酸(也称高碘酸)配合使用,过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。配制好的Schiff试剂接近于无色。
产品组成:
编号 名称 | D7804 | D7804 | Storage |
50ml | 100ml | RT避光 | |
使用说明书 | 1份 |
自备材料:
1、10%福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、过碘酸溶液
4、苏木素染色液,
5、酸性乙醇分化液
6、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。
4、切片入过碘酸溶液,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。
5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。
6、切片入Schiff Reagent,室温阴暗处浸染10~20min。
7、自来水冲洗10min。
8、入苏木素染色液,染细胞核1~2min。
9、酸性乙醇分化液分化2~5s。
10、自来水冲洗10~15min后,更换蒸馏水清洗使其返蓝。
11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:PAS反应阳性物质(糖原或多糖)呈红色或紫红色。
阴性对照(可选):
1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml,处理30~60min,与其他切片共同入过碘酸溶液,结果应为阴性。
2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他切片共同入过碘酸溶液,结果应为阴性。
3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。
注意事项:
1、Schiff Reagent应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多阳光和空气。在室温过低(小于15℃)情况下反应缓慢,可以置于适宜温水(小<30℃)中恢复后再使用。
2、理想的Schiff Reagent接近于无色,如果试剂颜色呈极轻微粉红色亦可考虑使用。如试剂颜色呈明显的红色应弃用。
3、颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
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