产品简介:
Hoechst 33258 也称 bisBenzimide H 33258或HOE 33258,分子式为 C25H24N6O 3HCl,分子量为533.88,CAS Number 23491-45-4。Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低,常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也用于普通的细胞核染色、DNA染色。
Hoechst 33258的zui大激发波长为346nm,zui大发射波长为460nm,Hoechst 33258和双链DNA结合后,zui大激发波长为352nm,zui大发射波长为461nm。NobleRyder Hoechst 33258染色液是浓缩的储存液,稀释后使用,一般推荐工作浓度为1~5μg/ml,用于固定细胞或组织的细胞核染色。
产品组成:
编号 名称 | D0811 | Storage |
1ml | -20℃避光 | |
使用说明书 | 1份 |
自备材料:
1、荧光显微镜
2、蒸馏水
3、微量秱液器
4、PBS 或生理盐水
操作步骤(仅供参考):
(一)固定的组织细胞染色
1、根据实验具体要求,用无菌去离子水秲释到自己所需浓度,即为Hoechst 33258染色工作液。细胞核染色时,一般推荐工作浓度为1~5μ g/ml。
2、于细胞或组织样品,固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,则*行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色,如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst 33258染色液,充分混匀。
3、室温放置 5~8min。
4、轻轻吸除Hoechst 33258染色液。
5、用无菌的 PBS 或生理盐水清洗2~3次,每次3~5min。
6、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
(二)活细胞染色
1、据实验具体要求,用无菌去离子水稀释到自己所需浓度,即为Hoechst 33258染色工作液。细胞核染色时,一般推荐工作浓度为1~5μg/ml。
2、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态,按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例,加入适当的Hoechst 33258染色液,染液必须充分覆盖细胞。
3、在适宜于细胞培养的条件下培养20~30min。
4、轻轻吸除Hoechst 33258染色液。
5、用无菌的 PBS 或生理盐水清洗 2~3 次,每次 3~5min。
6、进行荧光检测。
注意事项:
1、NobleRyder Hoechst 33258染色液(1mg/ml)应稀释至合适的浓度后使用。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
3、为减缓荧光淬灭,可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、避免反复冻融,否则容易失效。
5、Hoechst33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。